Luminometric Analysis of the Neutrophils Respiratory Burst inMicrotitre Plates

Luminometrická analýza respiračního vzplanutíneutrofilů v mikrotitračních destičkách

V práci je popsána luminometrická analýza respiračního vzplanutí neutrofilů v mikrotitračníchdestičkách. Byla analyzována chemiluminiscence neutrofilů v malých objemech plné krve a v tzv.buffy coatu (plazma s leukocyty po odstranění erytrocytů dextranovou sedimentací). K vyvolánírespiračního vzplanutí byly použity 4 typy aktivátorů – opsonizovaný zymosan, forbolmyristátacetát, N-formyl-Met-Leu-Phe a vápníkový ionofor A23187. Bylo zjištěno, že kinetika chemiluminiscenční odpovědi neutrofilů v plné krvi a v buffy coatu je velmi podobná pro jednotlivé typy aktivátorů, i když chemiluminiscenční aktivita plné krve byla vždy nižší v porovnání s buffy coatem. Tobylo pravděpodobně způsobeno zvýšenou expresí buněčných receptorů v důsledku separační procedury na straně jedné a zhášecími vlastnostmi erytrocytů (hemoglobinu) na straně druhé. Zezjištěných výsledků vyplývá, že luminometrická analýza v mikrotitračních destičkách je spolehlivým nástrojem pro měření respiračního vzplanutí neutrofilů, přičemž je nutné preferovat měřenív plné krvi.

Klíčová slova:
chemiluminiscence – neutrofily – respirační vzplanutí.