Molecular Study of the Type 2 von Willebrand Disease
Molekulární studie von Willebrandovy choroby typu 2
Východisko.
von Willenbrandova choroba (cWD) je vrozené krvácivé onemocnění provázené zejména slizničnímiprojevy. Je způsobena mutacemi v genu von Willebrandova faktoru (vWF). Cílem naší práce bylo genotypověi fenotypově charakterizovat toto vysoce heterogenní onemocnění u prvních pěti rodin v ČR.Metody a výsledky. Hladina FVIII:C byla stanovována jednofázovou metodou, vWF:Ag imunoelektroforetickya vWF:RiCo agregometricky.Multimerní struktura vWF byla analyzována metodou na principu western blotu, vazbavWF na faktor VIII byla měřena metodou na principu ELISA a vazba vWF na kolagen byla stanovena komerčnímkitem (ELISA). Dvě rodiny byly klasifikovány jako typ 2A, jedna jako typ 2B a dvě jako kombinace typů 1 a 2N.Na základě fenotypu byly vybírány fragmenty genu vWF pro detekci mutací. Pomocí kapilární SSCP (single-strandconformation polymorphism) s fluorescenční detekcí byly identifikovány úseky genu s abnormální sekvencí, kterébyly sekvenovány. Ve dvou rodinách s typem 2A byly nalezeny dříve popsané mutace Arg1374His a Gly1579Arg,v rodině s typem 2B vWD byla zjištěna známá záměna Arg1308Cys. Tyto mutace plně vysvětlují nalezený fenotypa dominantní typ dědičnosti. V jedné rodině s kombinovaným typem 1/2N byla prokázána známá delece cytosinu2435 a polymorfizmus Arg854Gln, u něhož byla popsána souvislost s typem2N. Kombinace obou defektů vysvětlujepřítomnost funkční a kvantitativní poruchy. U druhé rodiny s kombinovaným typem1/2Nbyla identifikována záměnaThr791Met, která vysvětluje jen sníženou hladinu FVIII. Pro objasnění kvantitativního deficitu vWF bude třebahledat další mutaci v celém rozsahu tohoto genu.Závěry. Pět studovaných rodin s vWD bylo fenotypově a genotypově charakterizováno podle revidované Sadlerovyklasifikace. Předkládané výsledky vytvářejí předpoklad pro širší studii vonWillebrandovy choroby v České republicea pro její racionálnější terapii.
Klíčová slova:
von Willebrandova choroba, vazba vWF na faktor VIII, multimery von Willebrandova faktoru, genvon Willebrandova faktoru.
Authors:
D. Habart; P. Smejkal 1; M. Matýšková 1; P. Turek; I. Hrachovinová; Z. Vorlová
Authors place of work:
Ústav hematologie a krevní transfuze, Praha 1Oddělení klinické hematologie FN, Brno
Published in the journal:
Čas. Lék. čes. 2003; : 373-376
Category:
Summary
Background.
von Willebrand disease is an inherited bleeding disorders caused by mutations in the von Willebrandfactor gene.We attempted to characterise the phenotype and the genotype in the first five families in Czech Republicaffected by this heterogeneous disorder.Methods and Results. The level of FVIII was measured by the one stage assay, the vWF:Ag by the immunoelectrophoresis,vWF:RiCo by aggregometry. For the vWF multimer analysis a western blot based techniqe was used.The vWF binding to FVIII was evaluated by the ELISA method. Two families were classified as the type 2A, oneas the type 2B and two as the combined type 1/2N. Based on that knowledge, parts of the vWF gene were selectedfor genetic analysis. The previously describedmutations Arg1374His andGly1579Argwere identified in two familieswith the type 2A. In the family with type 2B a substitution Arg1308Cys was detected. In one family with the type1/2N, two different previously described defects were found on the separate alleles of the vWF gene: a deletion ofcytosine 2435 and a polymorphism Arg854Gln. Compound heterzygotes had the type 1/2N phenotype, whilea carriers of the deletion had type 1 phenotype. In the second type 1/2N family, only the amino acid substitutionsThr791Me was found explaining the qualitative defect. A mutation underlying the quantitative deficiency needs tobe searched for throughout the entire vWF gene.Conclusions. Based on the characterisation of the phenotype and genotype, five apparently unrelated familes withthe von Willebrand disease were diagnosed according to the revised classification. Our work represents laboratorybasis for furhter studies into von Willebrand disease in Czech Republic.
Key words:
von Willebrand factor, von Willebrand disease, vWF gene.
Štítky
Addictology Allergology and clinical immunology Angiology Audiology Clinical biochemistry Dermatology & STDs Paediatric gastroenterology Paediatric surgery Paediatric cardiology Paediatric neurology Paediatric ENT Paediatric psychiatry Paediatric rheumatology Diabetology Pharmacy Vascular surgery Pain management Dental HygienistČlánok vyšiel v časopise
Journal of Czech Physicians
- Advances in the Treatment of Myasthenia Gravis on the Horizon
- Spasmolytic Effect of Metamizole
- Metamizole at a Glance and in Practice – Effective Non-Opioid Analgesic for All Ages
- What Effect Can Be Expected from Limosilactobacillus reuteri in Mucositis and Peri-Implantitis?
- Metamizole in perioperative treatment in children under 14 years – results of a questionnaire survey from practice
Najčítanejšie v tomto čísle
- Somatognosia, Body Scheme, Visceral and Somatic Phantom, and Phantom Pain
- Chromium as an Essential Element
- A Case of Babesia microti Infection Imported tothe Czech Republic from the USA
- Regulation of Receptor Function in the Central Nervous System