Detection of the Intracellular Molecules in Malignant Cells of HematopoieticOrigin by Flow Cytometry
STANOVENÍ INTRACELULÁRNÍCH MOLEKUL BUNĚKKREVNÍCH MALIGNIT PRŮTOKOVOU CYTOMETRIÍ
Východisko.
Průkaz membránových buněčných molekul pomocí imunofenotypizace patří v současnosti nedílnědo laboratorní diagnostiky krevních malignit. Imunochemický průkaz intracelulárních molekul je nezbytný v těchpřípadech, kdy je membránová výbava maligních buněk chudá, nebo pokud není výsledek průkazu membránovýchmolekul jednoznačný (např. ektopická exprese povrchových molekul jiné linie, nebo hybridní leukémie).Metod a výsledky. Pro stanovení nukleárních a cytoplazmatických molekul se nám osvědčila metodika používajícík fixaci buněk 4% roztok paraformaldehydu v pufrovaném fyziologickém roztoku, permeabilizace je zajišťovánalyzačním roztokem G (Becton Dickinson) a následným promýváním suspenze v pufrovaném fyziologickém roztokus přídavkem Tweenu 20. Tento jednoduchý postup jsme použili k průkazu intracelulárních molekul nutných prourčení liniové příslušnosti u všech námi dosud vyšetřených případů krevních malignit.
Klíčová slova:
imunofenotypizace, průtoková cytometrie, cytoplazmatické molekuly, jaderné molekuly.
Authors:
M. Toušková; J. Krejsek
Authors place of work:
Ústav klinické imunologie a alergologie LF UK a FN, Hradec Králové 1 Oddělení klinické hematologie LF UK a FN, Hradec Králové
Published in the journal:
Čas. Lék. čes. 2000; : 305-308
Category:
Summary
Background.
Detection of membrane molecules by immunophenotypisation is a routine counterpart of thelaboratory tests which are needed for the complex diagnostic procedures of hematopoetic malignancies at present.The immunochemical detection of intracellular molecules is essential in such cases, where the expression of surfacemolecules on malignant cells is poor, or where the results of other diagnostic analyses are unequivocal (cases withectopic expression of other lineage-specific molecules and cases of biphenotypic leukemias).Methods and Results. We followed the procedure using 4% solution of paraformaldehyd in phosphate bufferedsaline for fixation of cells. Lysing solution G (Becton-Dickinson) was used for permeabilisation of cells to detectnuclear and cytoplasmatic molecules. The permeabilised cell suspension was than washed with 0,5% solution ofTween 20 in phosphate buffered saline. This simple and rapid procedure is readily available for the routine detectionof intracellular molecules. This approach is important for the diagnosis of hematopoetic malignancies.
Key words:
immunophenotypisation, flow cytometry, cytoplasmatic molecules, nuclear molecules.
Štítky
Addictology Allergology and clinical immunology Angiology Audiology Clinical biochemistry Dermatology & STDs Paediatric gastroenterology Paediatric surgery Paediatric cardiology Paediatric neurology Paediatric ENT Paediatric psychiatry Paediatric rheumatology Diabetology Pharmacy Vascular surgery Pain management Dental HygienistČlánok vyšiel v časopise
Journal of Czech Physicians
- Advances in the Treatment of Myasthenia Gravis on the Horizon
- Spasmolytic Effect of Metamizole
- Metamizole at a Glance and in Practice – Effective Non-Opioid Analgesic for All Ages
- What Effect Can Be Expected from Limosilactobacillus reuteri in Mucositis and Peri-Implantitis?
- Metamizole in perioperative treatment in children under 14 years – results of a questionnaire survey from practice
Najčítanejšie v tomto čísle
- DNA Methylation and Neoplasia
- Effects of Normalised Levels of Previously Increased TSHon Patient’s Neuro-Psychologic Profile
- Endothelial Responses to Hypoxia
- Determinants of Interest for the Primary-Preventive Examination