Konfokální laserová endomikroskopie u experimentálního prasete. Metodika ex vivo zobrazení

Východisko.
Konfokální laserová endomikroskopie umožňuje in vivo bezprostřední zobrazení buněčných populací povrchových slizničních struktur normálních i patologických tkání s vysokým rozlišením a zvětšením. Cílem této studie bylo vypracovat metodiku ex vivo in vitro konfokální laserové endomikroskopie u experimentálních prasat a porovnat konfokální zobrazení s klasickou horizontální mikroskopií.

Materiál a metoda.
Do studie bylo zavzato pět dospělých samic prasete domácího. Po utracení zvířat byla provedena konfokální laserová endomikroskopie v časovém limitu 10–40 minut post mortem. Flurescenční látka (fluorescein) byla zvířatům aplikována před utracením intravenózně.

Výsledky.
Konfokální endomikroskopie byla úspěšně provedena u všech vzorků tkáně od všech zvířat (vždy jícen, žaludek, tenké a tlusté střevo). Podařilo se nám získat obrázky ve vysoké kvalitě v časovém limitu do 40 minut po utracení experimentálních zvířat. Endomikroskopické obrázky velmi dobře korespondují s odpovídajícími mikroskopickými obrazy klasické histologie barvené hematoxylin-eosinem.

Závěr.
Konfokální laserová endomikroskopie ex vivo in vitro u experimentálních zvířat je dobře proveditelná.

Klíčová slova:
konfokální laser, endomikroskopie, gastrointestinální, experimentální prasata.

Autoři: M. Kopáčová ¹; J. Bureš ¹; J. Österreicher ²; J. Květina ³; J. Pejchal ²; I. Tachecí ¹; M. Kuneš ³; S. Špelda ²; S. Rejchrt ¹
Působiště autorů: Second Department of Internal Medicine, Charles University in Praha, Faculty of Medicine at Hradec Králové, University Teaching Hospital, Hradec Králové, Czech Republic ¹; Department of Radiobiology, Faculty of Military Health Sciences, University of Defence, Hradec Králové, Czech Republic ²; Institute of Experimental Biopharmaceutics, Joint Research Center of Czech Academy of Sciences and PRO. MED. CS Praha a. s., Hradec Králové, Czech Republic ³
Vyšlo v časopise: Čas. Lék. čes. 2009; 148: 249-253
Kategorie: Původní práce

Souhrn

Závěr.
Konfokální laserová endomikroskopie ex vivo in vitro u experimentálních zvířat je dobře proveditelná.

Klíčová slova:
konfokální laser, endomikroskopie, gastrointestinální, experimentální prasata.

Zdroje

1. Sakashita M, Inoue H, Kashida H, Tanaka J, Cho JY, Satodate H, et al. Virtual histology of colorectal lesions using laser-scanning confocal microscopy. Endoscopy 2003; 35: 1033–1038.

2. Kiesslich R, Burg J, Vieth M, Gnaendiger J, Enders M, Delaney P, et al. Confocal laser endoscopy for diagnosing intraepithelial neoplasias and colorectal cancer in vivo. Gastroenterology 2004; 127: 706–713.

3. Kiesslich R, Goetz M, Vieth M, Galle PR, Neurath MF. Confocal laser endomicroscopy. Gastrointest Endosc Clin N Am 2005; 15: 715–731.

4. Kakeji Y, Yamaguchi S, Yoshida D, Tanoue K, Ueda M, Masunari A, et al. Development and assessment of morphologic criteria for diagnosing gastric cancer using confocal endomicroscopy: an ex vivo and in vivo study. Endoscopy 2006; 38: 886–890.

5. Inoue H, Kudo S, Shiokawa A. Technology insight: Laser scanning confocal microscopy and endocytoscopy for cellular observation of the gastrointestinal tract. Nat Clin Pract Gastroenterol Hepatol 2005; 2: 31–37.

6. Meining A, Saur D, Bajbouj M, Becker V, Peltier E, Höfler H, et al. In vivo histopathology for detection of gastrointestinal neoplasia with a portable, confocal miniprobes: an examiner blinded analysis. Clin Gastroenterol Hepatol 2007; 5: 1261–1277.

7. Goetz M, Kiesslich R, Dienes H-P, Drebber U, Murr E, Hoffman A, et al. In vivo confocal laser endomicroscopy of the human liver: a novel method for assessing liver microarchitecture in real time. Endoscopy 2008; 40: 554–562.

8. Stephens DJ, Allan VJ. Light microscopy techniques for live cell imaging. Science 2003; 300: 82–86.

9. Hoffman A, Goetz M, Vieth M, Galle PR, Neurath MF, Kiesslich R. Confocal laser endomicroscopy: technical status and current indications. Endoscopy 2006; 38: 1275–1283.

10. Kopáčová M, Rejchrt S, Tyčová V, Tachecí I, Ryška A, Bureš J. Confocal laser scanning endomicroscopy. Initial experience in the Czech Republic. Folia Gastroenterol Hepatol 2007; 5(3-4): 20–31. Available at http://www.pro-folia.com.

11. Colt HG. Basic principles of laser-tissue interactions. UpToDate on line 16.2. Wellesley, 2008.

12. Kiesslich R, Neurath MF. Endoscopic detection of early lower gastrointestinal cancer. Best Pract Res Clin Gastroenterol 2005; 19: 941–961.

13. Polgase AL, McLaren WJ, Skinner SA, Kiesslich R, Neurath MF, Delaney PM. A fluorescence confocal endomicroscopy for in vivo microscopy of the upper- and the lower-GI tract. Gastrointest Endosc 2005; 62: 686–695.

14. Guo Y-T, Li Y-Q, Yu T, Zhang T-G, Zhang J-N, Liu H, et al. Diagnosis of gastric intestinal metaplasia with confocal laser endomicroscopy in vivo: a prospective study. Endoscopy 2008; 40: 547–553.

15. Kiesslich R, Goetz M, Lammersdorf K, Schneider C, Burg J, Stolte M, et al. Chromoscopy-guided endomicroscopy increases the diagnostic yield of intraepithelial neoplasia in ulcerative colitis. Gastroenterology 2007; 132: 874–882.

16. Hurlstone DP, Kiesslich R, Thomson M, Atkinson R, Cross SS. Confocal chromoscopic endomicroscopy is superior to chromoscopy alone for the detection and characterisation of intraepithelial neoplasia in chronic ulcerative colitis. Gut 2008; 57: 196–204.

17. Explanatory report on the European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes. Strasbourg: Council of Europe 1986; 1–75.

18. Kopáčová M, Tachecí I, Květina J, Bureš J, Kuneš M, Špelda S, et al. Wireless video capsule enteroscopy in preclinical studies: methodical design of its applicability in experimental pigs. In press. Dig Dis Sci 2009; in press; DOI 10.1007/s10620-009-0779-3

19. Hurlstone DP, Baraza W, Brown S, Thomson M, Tiffin N, Cross SS. In vivo real-time confocal laser scanning endomicroscopic colonoscopy for the detection and characterization of colorectal neoplasia. Br J Surg 2008; 95: 636–645.

20. Kuneš M, Květina J, Bureš J, Kopáčová M, Maláková J, Tachecí I, et al. Pharmacokinetics and organ distribution of fluorescein as a diagnostics for cells-confocal laser endomicroscopy of gastrointestinal tract (experimental pig). In press.

21. Goetz M, Fottner C, Schirrmacher E, Delaney P, Gregor S, Schneider C, et al. In-vivo confocal real-time mini-microscopy in animal models of human inflammatory and neoplastic diseases. Endoscopy 2007; 39: 350–356.

22. Goetz M, Memadathil B, Biesterfeld S, Schneider C, Gregor S, Galle PR, et al. In vivo subsurface morphological and functional cellular and subcellular imaging of the gastrointestinal tract with confocal mini-miscroscopy. World J Gastroenterol 2007; 13: 2160–2165.

23. Goetz M, Vieth M, Kanzler S, Galle PR, Delaney P, Neurath MF, et al. In vivo confocal laser laparoscopy allows real time subsurface microscopy in animal models of liver disease. J Hepatol 2008; 48: 91–97.

Štítky

Adiktológia Alergológia a imunológia Angiológia Audiológia a foniatria Biochémia Dermatológia Detská gastroenterológia Detská chirurgia Detská kardiológia Detská neurológia Detská otorinolaryngológia Detská psychiatria Detská reumatológia Diabetológia Farmácia Chirurgia cievna Algeziológia Dentální hygienistka

Článek Od etikoterapie k moderní psychoterapii

Článek Celiakie a její vztah ke kostnímu metabolismu

Článek Knihy

Článek Týrání dětí v populaci běžných rodin – longitudinální studie

Článek O lidské dlouhověkosti – 1. vnější vlivy

Článek Význam signálních mediátorů ve vývoji vlasu

Článek Význam matrimetaloproteináz v akné

Článek DESIDENT CaviCide – nový dezinfekční přípravek

Článek Pomůcka pro určení progrese u atopické dermatitidy

Článek Co by měli vědět rodiče o prevenci

Článek RODINNÝ LÉKAŘ – ČESKÁ LÉKAŘSKÁ SPOLEČNOST JEP A JEJÍ ODBORNÍCI V POŘADECH ČESKÉHO ROZHLASU 2 – PRAHA

Článek Čestné medaile české lékařské společnosti JEP